色谱分析的目的是将样品中各组分彼此分离，组分要达到完全分离，两峰间的距离必须足够远，两峰间的距离是由组分在两相间的分配系数决定的，即与色谱过程的热力学性质有关。但是两峰间虽有一定距离，如果每个峰都很宽，以致彼此重叠，还是不能分开。这些峰的宽或窄是由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定的，即与色谱过程的动力学性质有关。
难分离物质对的分离度大小受色谱过程中两种因素的综合影响：
色谱过程的热力学因素──保留值之差；
色谱过程的动力学因素──区域宽度(峰宽)。
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色谱分离中的四种情况如上图所示：
① 柱效较高，△K(分配系数)较大,完全分离；
② △K不是很大，柱效较高，峰较窄，基本上完全分离；
③ 柱效较低，△K 较大，但分离的不好；
④ △K小，柱效低，分离效果更差
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分离度的表达式：
R=0.8：两峰的分离程度可达89%；
R = 1：分离程度98%；
R = 1.5：达99.7%（相邻两峰完全分离的标准）
一般经验，液相色谱法中分离度的提升的方法：
改变有机改性剂的种类和比例；
改变流动相的pH值；
减小流速；
降低柱温；
减少进样量；
选择粒径小的色谱柱；
选择较长的色谱柱。
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