一、基线漂移原因及解决方法
I.原因分析
① 柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)
②流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)
③流通池被污染或有气体
④检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线)
⑤流动相配比不当或流速变化
⑥柱平衡慢,特别是流动相发生变化时
⑦流动相污染、变质或由低品质溶剂配成
⑧样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰
样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。
⑨使用循环溶剂,不提倡。未调整检测器。
⑩检测器没有设定在最大吸收波长处。
II.解决方法
①控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器
②使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用在线脱气或氦气脱气。
③用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。(不要用盐酸)
④取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。
⑤更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
⑥用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。使用离子对试剂、缓冲盐更应注意平衡柱。
⑦检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂 ⑧改变分析条件。使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。
⑨重新设定基线。使用新的流动相。
⑩将波长调整至最大吸收波长处。重选检测波长。
二、规则的基线噪音产生的原因?
I.产生原因
①在流动相、检测器或泵中有空气(尖锐峰)
②漏液 。
③流动相混合不完全 。
④温度影响(柱温过高,检测器未加热)
⑤在同一条线上有其他电子设备(偶然噪声)
⑥泵振动
II.解决方法
①流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的 空气。
②检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有 盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换泵密封。
③用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂
④减少差异或加上热交换器
⑤断开LC、检测器和记录仪,检查干扰是否来自于外部,加以更正。 采用精密级稳压电源。
⑥在系统中加入脉冲阻尼器。
三、不规则的基线噪音产生的原因?
I.产生原因
①漏液。
②流动相污染、变质或由低质溶剂配成
③流动相各溶剂不相溶
④检测器/记录仪电子元件的问题
⑤系统内有气泡
⑥检测器内有气泡
⑦流通池污染(即使是极少的污染物也会产生噪音。)
⑧检测器灯能量不足
⑨色谱柱填料流失或阻塞
⑩流动相混合不均匀或混合器工作不正常
II.解决方法
①检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换密封。检查流通池是否漏液。
②检查流动相的组成。
③选择互溶的流动相
④断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。
⑤用强极性溶液清洗系统
⑥清洗检测器,在检测器后面安装背景压力调节器
⑦用1N的硝酸(不能用磷酸)清洗流通池
⑧更换灯
⑨更换色谱柱
⑩维修或更换混合器,在流动相不走梯度时,建议不使用泵的混合装置
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