4、关注溶剂效应
溶剂效应原定义为溶剂对于反应速率、平衡甚至反应机理的影响。针对于分析方法，主要指的是对溶解平衡的影响，涉及稀释剂与流动相、流动相与固定相。
4.1、稀释剂选择不当引起的溶剂效应-现象及原理
样品溶液的溶剂强度强于流动相溶剂强度时可能会造成的峰展宽、峰分叉现象，其过程为当溶解样品的溶剂不同于流动相时，样品溶剂与流动相发生混合，样品溶剂被冲稀。如果进样溶剂之强度高于流动相，样品在瞬间会表现为在较强溶剂中，并以较快速度通过色谱柱。色谱行为就是∶色谱峰的保留时间缩短。`当进样溶剂与流动相混合时，一部分分子会先与流动相混合，致使这些分子通过色谱柱的速度发生变化，使峰形扭曲，发生变形。
案例
某项目采用乙腈：水（50：50，v/v），谱图如下：
采用乙腈：缓冲盐ph7.8(50：50，v/v),谱图如下：
4.2、稀释剂选择不当引起的溶剂效应-如何判定
通过HPLC仪器比对一下两个劈叉峰的紫外吸收波谱，第一就是通过HPLC仪器比对一下两个劈叉峰的紫外吸收波谱，看看他们是否能完全一样的μV特征吸收，第二将进样体积调节到0.1μl看看，峰是否好转，如果满足上面两个条件几乎就可以肯定是100%的溶剂效应。
4.3、稀释剂选择不当引起的溶剂效应-如何避免
降低稀释的强度（如增加水相比例、调整pH等）或更换稀释剂为流动相，2、在保证检测灵敏度的前提下，降低进样量。3、增加峰形前延抑制器，峰形前延抑制器的设计原理是，在色谱柱前端引入一个大小合适的空腔，使样品到达色谱前被存留于空腔内的流动相（色谱柱平衡时流动相会充满空腔）稀释，使“样品溶剂”经稀释后更接近流动相的组成，实现“样品溶剂与流动相的组成接近”，并取代“用流动相溶解样品”的解决方案。
4.4、基质效应（溶剂效应的一个变种）
基质效应是指检测系统检测样品中的分析物时，处于分析物周围的所有非分析物质对分析物测定的影响。产生基质效应的原因与以下四个因素有关：仪器的设计、试剂的组成成分、测试方法的原理、质控材料的组成及处理技术等，通过回收率可以评估分析方法是否受基质效应的影响，一般若回收率普遍偏低、偏高或波动较大，建议考虑基质效应的影响。
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