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UPLC使用常见问题
液相基线噪音干扰
如果出现基线噪音较大的情况，首先应该排除检测器的问题。
步骤如下：
排查流动相问题时，需要重点考虑流动相的组成及检测波长是否发生了改变？
一定要确定您所用仪器上最后使用的流动相是什么？为了避免这个问题，在接上个人用仪器之前，要连接两通，用超纯水将仪器管路全部清洗一遍。
此外还需要考虑流动相的互溶性的问题。不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶，超出范围后就不互溶，使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时，还可能析出盐的晶体，尤其使用磷酸盐时需特别小心。
梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高，为了保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱，以辩证溶剂杂质峰。
分析弱酸性样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液；分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。
流动相中加入有机胺可以减弱弱碱性样品和残余硅醇基的强相互作用，减轻或消除峰拖尾现象。所以在此使用的有机胺也成为减尾剂。
要确保所使用流动相不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。
即使经过0.22um滤膜过滤，在保质期时间内，有的流动相仍会存在长菌、沉淀、结晶等现象。
流动相不干净，进入液相系统是非常危险的，尤其是缓冲盐。
在此有一个小窍门：用激光笔测试，不干净的缓冲盐溶液在激光笔照射时，里面会看到一条红线。
最后，还有滤膜的相容性问题，有的滤膜可以引起基线及噪音的波动，遇到这种情况，需要进行滤膜筛选。
液相压力波动
最常见原因是泵内有气泡。
其他还有：
溶剂进口过滤芯堵塞（最好更换新的过滤芯，一旦长菌，是不可逆的）、未充分混匀（尤其是有机相和水相相差比例悬殊时）、溶剂未脱气、泵的密封垫老化、出口单向阀实效、主动阀失效等。
液相压力过低包含原因
首先想到的是连接管路泄露或其他设备不密封，如泵头密封垫。
还会存在溶剂进口过滤芯堵塞，溶剂无法通过、溶剂或流速改变、主/被动阀失灵、
四元比例阀失灵、单向出口阀失灵、色谱柱固定相流失等原因。
液相压力过高包含原因
这个原因各位同仁应该都很熟悉，如：色谱柱污染、柱子进口过滤芯被污染、PURGE阀过滤芯污染、连接管路堵塞、进样器旋转密封阀被堵塞或进样针或针座被堵塞等。
系统优化时所需过度溶剂
1.反相和正相相互转换：
所用溶剂为异丙醇，原因：排除系统中空气的最好溶剂。
2.使用缓冲液后冲洗系统：
所用溶剂为二次蒸馏水，原因：再溶解缓冲液结晶的最好溶剂。
3.更换溶剂后：
所用溶剂为二次蒸馏水，原因：再溶解缓冲液结晶的最好溶剂。
仪器易损件维护时间
各位同仁也可按照自己的SOP来操作，对于不差钱的单位，可以直接购买仪器配套的维修包。
以上内容可能对于大家来说过于基础，但是每一个行业，从来没有好走的路，唯一的捷径，就是踏踏实实地把自己変专业。
学好基本知识，总结一些实用的小方法，可以帮助大家节约成本、节约时间，提高效率。
由于UPLC是一个新兴的领域，有些规定还不完善，如果大家有好的使用建议，欢迎在下方留言，以供大家讨论学习。
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