液相色谱堵塞原因分析
堵在液相色谱使用过程中是经常出现的,今天我们一起来探究一下HPLC常见堵塞原因有哪些,了解故障发生的原因,既可以在碰到堵塞故障时不至于束手无策,又可以防微杜渐,防患于未然。
1 避免长菌
在夏季很容易滋生微生物或藻类,长期这么使用,溶剂过滤头、管路、脱气机、比例阀、色谱柱等容易损坏,不仅维修费用高,还耽误实验进度。小长假仪器长期不使用时,需要把使用水相的管路用有机相置换,防止长菌。
2 规范使用流动相
流动相要临用现配,贴好标签,写明有效期,配置日期等。使用色谱级试剂,尽量使用0.2μm滤膜过滤含盐流动相,使用0.45μm滤膜过滤有机相,注意溶剂与滤膜的兼容性。
进行梯度实验时要注意梯度变化过程中流动相的互溶性,不能互溶的溶剂不可以直接切换,使用异丙醇作为过渡溶剂切换。使用缓冲盐的流动相时注意过渡,不要直接使用高有机相冲,避免盐析,并注意清洗泵柱塞杆。对于等度纯盐相实验如Ch.P中磷酸肌酸钠项目,建议小哥哥小小姐姐们可以将配置好的流动相在冰箱中冷藏,半天后更换放置至室温的新的流动相。其他等度条件水相与有机相预混后上机,不要用泵比例阀在线混合。
3 正确使用乙腈
乙腈可以聚合,在常温光照的条件下就可以缓慢的聚合,这种聚合体会逐渐沉积在入口单向阀的宝石球上面,从而影响泵的精度,所以在使用乙腈的时候要注意:
○ 乙腈尽量现用现倒,勤换新。
○ 最好用棕色的瓶子装乙腈,避免阳光直射。
○ 保持乙腈清洁,尘埃或者其他杂质可能成为聚合物形成的“凝结核”。
○ 如果阀已经被乙腈聚合物给粘住了,可以用热水-异丙醇冲洗管路,或者超声处理,可以溶解聚合物。
4 样品前处理不能少
样品基质比较复杂的情况下,样品的净化过滤就更重要了,样品处理不好,容易堵进样口及色谱柱。样品要过滤后上机。
5选用优质的耗材
进样瓶及盖垫选择不合适,可能对实验结果造成影响,更严重的会对仪器造成损毁,如下图中因为进样瓶盖选择不正确,导致进样针扎弯。
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