高效液相色谱
与气相色谱相比液相色谱的优点 :与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以及其他各种高分子化合物等。此外,液相色谱的流动相不仅起到使样品沿色谱柱移动的作用,而且与固定相一样,与样品分子发生选择性的相互作用,这就为控制和改善分离条件提供了一个额外的可变因素。而气相色谱法采用的流动相是惰性气体,对组分没有亲和力,仅起运载作用。
液相色谱特点 :高压、高速、高效、高灵敏度、高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。
高效液相相色谱仪的组成 :高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统。
进样系统 要求 :良好的密封性,最小的死体积,最好的稳定性,进样时对色谱系统压力、流量影响较小。
分离系统:色谱柱是实现分离的核心部件。由柱管和固定相组成。柱管为直型不锈钢管。一般色谱柱长5~30 cm,内径4~5 mm,凝胶色谱柱内径3~12 mm,而制备色谱柱内径则可达25 mm。一般淋洗溶剂在进入色谱分离柱之前,先通过前置柱。HPLC柱的填料颗粒粒径一般约为3~10 m,填充常采用匀浆法。色谱柱的发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
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高效液相色谱
9 检测系统 :作用——用来连续监测经色谱柱分离后的流出物的组成和含量变化的装置。紫外-可见吸收检测器、光电二极管阵列检测器、示差折光检测器、荧光检测器、电化学检测器。
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