凯氏定氮法测定原理

凯氏定氮法

原理：蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，蛋白质含量。含氮量×6.25=蛋白含量。有机物中的胺根在强热和CuSO4、浓H2SO4作用下，硝化生成（NH4）2SO4。

1、凯氏定氮法反应式为：

2NH2+H2SO4+2H=（NH4）2SO4 （其中CuSO4做催化剂）

2、在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于H3BO3溶液中反应式为：

（NH4）2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4

2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O

3、用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量反应式为：

(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=（NH4）2SO4 +4H3BO3

(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3