色谱心脏之小小色谱柱&融汇贯通,见微知著!
市场上的色谱柱品牌几十种!
分析技术的核心是色谱柱,要求柱效高、柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。而色谱柱的核心是填料。填料本身的种类以及质量的优略是决定色谱柱性能的根本原因。此外,填料的填充也是决定色谱柱性能另一个重要因素。
一、色谱柱的结构组成
1)色谱填料:经过制备处理后,用于填充色谱柱的物质颗粒,通常是1.7-10μm粒径的球形颗粒。
2)色谱柱管:内部抛光的不锈钢管。典型的液相色谱分析柱尺寸是内径4.6mm,长250mm。
色谱柱:也称固定相,是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的,其结构如下图所示。
色谱柱结构示意图
二、色谱柱的填料
色谱填料是由功能层和基质两部分构成。
1)功能层: 是通过物理或化学的方法固定在基质表面的、对样品分子的保留起实质作用的有机分子或功能基团。如下图是硅胶基质的ODS(C18)固定相的结构示意图,功能层ODS(C18)键合在硅胶基质的表面。
硅胶基质的ODS示意图
2)基质: 又常称作载体或担体,通常制备成数微米至数十微米粒径的球形颗粒,它具有一定的刚性,能承受一定的压力,对分离不起明显的作用,只是作为功能基团的载体。常用来作基质的有硅胶与有机高分子聚合物微球。
硅胶基质微球结构图
3)填料的物理结构:分为微孔型(或凝胶型)、大孔型(全多孔型)、薄壳型和表面多孔型四种类型,如下图所示。
典型液相色谱固定物理结构图
典型核壳填料HALO COLUMN
三、色谱柱知识小结