根据《 湖南省市场监督管理局关于下达2019年地方标准制修订项目增补计划的通知》的要求,由湖南省兽药饲料监察所等单位组织制定的湖南省地方标准《黄曲霉毒素B1快速检测 超导量点免疫荧光法》已完成征求意见稿,根据《地方标准管理办法》的要求,现面向社会公开征求意见。请有关单位进行讨论、填写《征求意见反馈表》。请于2020年8月28日前将意见反馈至湖南省兽药饲料监察所。感谢您的参与和支持。电子邮箱:642055795@qq.com
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节选该标准部分内容:
本标准规定了饲料中黄曲霉毒素B1的超导量点免疫荧光快速定量法的原理、试剂、材料、仪器设备、样品制备、样品测定与结果表述。
本标准适用于我省植物性饲料原料、配合饲料、浓缩饲料中黄曲霉毒素B1的快速检测。
原理
本方法基于超导量点标记的抗原抗体反应,采用荧光侧向免疫层析方法学原理。试样提取液中的黄曲霉毒素B1与检测卡上标记的抗体相结合并发出荧光,荧光强度与试样中黄曲霉毒素B1含量相关。层析结束后,用免疫荧光分析仪测定检测卡上的检测线和控制线的荧光强度,仪器根据内置标准曲线自动算出试样中黄曲霉毒素B1的含量。
试剂与材料
除另有说明外,所用试剂均为分析纯,实验室用水应符合GB/T 6682中三级水的要求。
稀释缓冲液:由超导量点免疫荧光定量检测卡配套提供,或根据产品使用说明书配制。
4提取液:量取550mL甲醇加入450mL水中,混匀。
仪器与设备
天平:分度值0.01g。
粉碎机:可使试样粉碎后全部通过20目筛。
离心机:转速不低于4000 r/min。
涡旋振荡器。
免疫荧光分析仪:可测定并显示超导量点免疫荧光定量检测卡的测定结果。
黄曲霉毒素B1超导量点免疫荧光定量检测卡:常温避光储存,具体储存条件参照使用说明;技术要求见附录A。
滤纸:采用中速定量滤纸。
计时器。
样品测定
开启免疫荧光分析仪(5.5)。
将超导量点免疫荧光定量检测卡(5.6)取出,加样孔朝上平放。
准确移取75μL待测液(6.2.2),加入检测卡加样孔中。
检测卡加样后,水平静置15 min反应,然后在3 min内将检测卡插入免疫荧光分析仪(5.5),仪器将自动进行检测。
免疫荧光分析仪(5.5)将在13秒内完成数据读取、分析,免疫荧光分析仪自动显示试样中黄曲霉毒素B1的含量并保存检测结果。
若免疫荧光分析仪的显示值>50 μg/kg,需移取100 μL 6.2.2中滤液或上清液,加入300 μL试样提取液(4.2),充分混匀后取100 μL至一洁净的离心管中,加入400 μL稀释缓冲液(4.1),充分混匀,按照7.2~7.5进行测定。
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