手机版|
二维码|
色谱（三）：色谱基础知识&专业词汇知多少！
一、保留时间与容量因子
在整个色谱分离过程中，流动相始终是以一定的流速（或压力）在固定相中流动的，并将溶质带入色谱柱。溶质因分配、吸附等相互作用，进入固定相后，即在固定相表面与功能层分子作用，从而在固定相中保留。同时，溶质又被流动相洗脱下来，进入流动相。与固定相作用越强的溶质在固定相中的保留时间就越长。
从色谱柱流出的溶液（柱流出物）进入检测器连续测定，得到如图7-1所示的色谱图，即柱流出物中溶质浓度随时间变化的曲线，直线部分是没有溶质流出时流动相的背景响应值，称作基线（base line）。在基线平稳后，通常将基线响应值设定为零，再进样分析。溶质开始流出至完全流出所对应的峰型部分称色谱峰（peak），基线与色谱峰组成了一个完整的色谱图（chromatogram）。
1）死时间(dead time)
2）溶质保留时间（solute retention time）
3）保留时间（retention time）
4）容量因子（capacity factor）
1）死时间(dead time)： 在色谱柱中无保留的溶质从进样器随流动相到达检测器所需要的时间，通常用t0表示。
2）溶质保留时间（solute retention time）： 或称真实保留时间，是溶质因与固定相作用在色谱柱中所停留的时间，它不包含死时间，通常用tS表示。
3）保留时间（retention time）： 是tS与t0之和，通常用tR表示，即
tR = t0 + tS (1)
4）容量因子（capacity factor）： 对于有效的色谱分离，色谱柱必须具有保留溶质的能力，而且还能使不同溶质之间达到足够大的分离。色谱柱的容量因子是溶质离子与色谱柱填料相互作用强度的直接量度，由下式定义：
(2) 式中VR 和V0 分别为总保留体积和空保留体积。
图1 色谱图与保留时间概念
二、 色谱峰的对称性
1）高斯（Gaussian）曲线
2）不对称因子（asymmetry）
3）拖尾峰（tailing peak）
4）伸舌峰（leading peak或fronting peak）
1）高斯（Gaussian）曲线： 在理想情况下，色谱峰的形状可以近似地用高斯曲线描述（图3）。图中为标准偏差（拐点处的半峰宽），h为最大峰高，w为峰宽。
图2 高斯曲线
在任意给定位置x处的峰高y可以用下式描述：
(3)(式中Y0为峰极大值，即Y0=h）
2）不对称因子（asymmetry）： 在实际的色谱过程中，溶质从色谱柱中流出时，很少符合高斯分布，而是具有一定的不对称性。我们可以定义一个不对称因子As来定量地表示色谱峰的不对称程度，如图7-3所示，将10％峰高处前半峰的宽度设为a, 同高度处后半峰的宽度设为b，将b与a的比值定义为不对称因子As，即
As=b/a (4)
3）拖尾峰（tailing peak）： 当As大于1时，色谱峰的形状是前半部分信号增加快，后半部分信号减少慢。引起峰拖尾的主要原因是溶质在固定相中存在吸附作用，因此，拖尾峰也称为吸附峰。
4）伸舌峰（leading peak或fronting peak）： 当As小于1时，色谱峰是前半部分信号增加慢，后半部分信号减小快。因为伸舌峰主要是固定相不能给溶质提供足够数量合适的作用位置，使一部分溶质超过了峰的中心，即产生了超载，所以也称超载峰。
图3 不对称因子的定义
版权与免责声明：
① 凡本网注明"来源：科学仪器网"的所有作品，版权均属于科学仪器网，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用。已获本网授权的作品，应在授权范围内使用，并注明"来源：科学仪器网"。违者本网将追究相关法律责任。
② 本网凡注明"来源：xxx（非本网）"的作品，均转载自其它媒体，转载目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，且不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。
③ 如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为默认科学仪器网有权转载。
