色谱(四):色谱基础知识专业词汇知多少!
一、分离度
色谱分析的目标就是要将混合物中的各组分分离,两个相邻色谱峰的分离度R(resolution)定义为两峰保留时间差与两峰峰底宽平均值之商,即
(1)
式中tR1和tR2分别为峰1和峰2的保留时间;w1和w2分别为峰1和峰2在峰底(基线)的峰宽,即通过色谱峰的变曲点(拐点)所作三角形的底边长度。
计算分离度所需的参数都可以从色谱图(图2)中获得。
如果色谱峰呈高斯分布,则分离度R=2(相当于8分离)即可完全满足定量分析的需要。因为在基线位置的峰宽w为4,R=2时,两个峰完全达到了基线分离。通过调节色谱条件还可获得更高的R值,不过这时的代价将是分析时间增加。如果两组分浓度相差不是太大,分离度R=0.5时,仍然可以看得出两个峰的峰顶是分开的。
图1 计算分离度和选择性的参数
二、选择性系数
两个组分达到分离的一个决定性参数就是两组分的相对保留值,将其定义为两个色谱峰真实保留时间之比,称作选择性系数,即
(2)
计算选择性系数所需参数也可以从色谱图(图2)中获得。选择性系数主要由固定相的性质所决定,在高效液相色谱(HPLC)中,选择性系数也受流动相组成的影响。当选择性系数=1时,则说明在给定的色谱条件下,两组分不存在热力学上的差异,无法实现相互分离。
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