1、 没有获得预期的PCR产物的解决方法
1)确认是否加入Taq酶, 检查Taq酶是否有活性。
2) DNA解链是否充分。
3) 人工合成的引物是否合适。
4)在未加DNA聚合酶前将反应系统在95℃保温5~10min, 使蛋白酶及核酸酶失活。
2、 PCR产物凝胶电泳呈扩散状的解决方法
l) 减少DNA聚合酶的浓度。
2)增加退火温度。
3)降低Mg“ 浓度。
4) 减少退火时间及延伸时间。
5) 减少周期次数。
3、 凝胶电泳中出现引物二聚体条带的解决方法
1)检查引物3'端是否互补。
2)重新设计较长的引物.
3)增加模板DNA的鱼.
4)降低引物浓度。
5)减少周期次数。
6) 提高退火温度。
4、PCR产物特异性不高的解决方法
1)提高退火温度。
2)减少退火时间及延仲时间。
3) 降低引物和聚合酶的浓度。
4)改变M矿浓度。
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