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       荧光共振能量转移(lluorescence resonance energy transfer,FRET)是指通过供受体发色团之间偶极佷比极相互作用, 能被从供体发色团转移至受体发色团, 转移效率与两个发色团之间距离的6次寤倒数成比例。直到FRET应用于PCR定贵后上述问题才得到较好的解决, 井扩大了PCR技术的应用, 如可广泛应用于临床观测患者病情发展及预后、判断药物疗效等。FRET在结构生物学、生物化学及分子距离测定的多学科内也有广泛的应用价值。
聚合酶链式反应凭借敏感、特异、快速的特点荣获1993年诺贝尔化学奖。因其在病原体检测方面的独特优势, 因而发达国家在相关方法和仪器方面的研发非常快, 成为分子生物学诊断的主流, 至今仍处于学术和应用前沿,PCR仪器经历了三代产品。
 
1) 第一代产品:基因扩增热循环仪(DNA thermal cycler)+电泳仪+紫外分析仪十定性试剂, 构成PCR定性检测。
2)第二代产品: 基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定识试剂, 构成PCR-DNA终点法定量检测(end-point quantitative PCR detection)` 又分为终点酶免定量(endpointELISA干CR)和终点荧光定员(end-point fluor-PCR)两种。
3)第三代产品:实时定量QPCR仪+实时荧光定量试剂, 构成QPCR-DAN/RNA实时荧光定量检测。基因分析的定量化和均相化是未来基因诊断的发展趋势, 目前在该领域的研究刚刚起步、仍有许多问题需要解决, 如分析灵敏度及重复性、自动化仪器和试剂成本、样品处理及多基因同时分析等。生物芯片技术与荧光探针定量技术的结合将有助于述问题的解决,届时将大大推动该技术的在生命科学领域的应用普及特别是临床诊断领域的
推广。

实时PCR的主要优点在于在一种巨大的动力学范围内测景核酸分子浓度的能力,并且以它的环灵敏度与大容坎的井行操作为特征, 能同时检测许多样品。 与传统的PCR产物的终点测量法不同, 实时PCR提供关于PCR的动力学的瞬时信息。 因此在不同样品之间扩增效率方面的差异能够通过计算获得补偿。