超高效液相色谱法简介
超高效液相色谱法在近些年来得到了快速的发展,其是一种液相技术,其主要是采用了小颗粒填料,使得柱效速度明显加速,能够有效提高检验时间,从而减少溶剂消耗量。由于超高效液相色谱法与普通高效液相比具有更高的优势,因此在临床检验中得到了广泛的应用。
高效液相色谱法是一种有效的分析方法,具有敏感度高且分离度好的优势而被广泛应用于食药分析与化工生产等方面。随着现代技术的不断进步,人们需要一种分离度理想且检验速度更快的技术,从而满足大量样本检验的需求[1]。在这一要求的推动下,超高效液相色谱法孕育而生。
2004年美国沃特丝公司推出了第一台超高效液相色谱仪,标志着该技术的诞生。超高效液相色谱法采用了<2um的色谱柱填料,从而能够提高分离效率。因此超高效液相色谱法的主要优势集中在以下几点:①分析速度快:由于填料直径的减小能够提高线速度,同时不影响柱效,并且能够根据比例缩短色谱柱的长度,实现分析速度的提示。有学者利用超高效液相色谱法分析不同尼泊金酯类物质,在确保分离度相同的情况下,使用5um的色谱柱的分离速度相比于普通高效液相色谱法显著提升[2]。②分离度好:由于等度液相分离度方程可知,填料直径的减少能够提高分离度,有学者通过检验发现,利用超高效液相色谱法对尿液中乙酰氨基酚代谢物检测时间能够从传统方法的4.8s减少为3.0s,同时分离出的代谢物数量明显升高,这代表了利用超高效液相色谱法能够提高检验的精确度,从而减少误差的出现,能够有效提高临床检验的效果与质量,也为现代实验室检验提供了新的方法。③检验准确率高:填料直径的缩小能够让色谱峰更窄,因此信噪比也有所升高,这使得敏感性也可以得到相应的提升,有研究通过对比发现,利用超高效液相色谱法检测大鼠血浆药物浓度的敏感性提升了5倍以上。④减少基质效应:超高效液相色谱法利用最佳线速能够让质谱承受的相应的流速,使得离子化反应的效率提升;同时,由于分离度的提高,色谱峰扩展较小,峰浓度较高,这使得复合物中的成分分离速度加快,使得杂质分离速度也更快,从而减少基质效应,提高检验的重现性和敏感度。总体来说,超高效液相色谱法与传统的高效液相色谱法相比,分离度、检验速度以及检验精确度得到了显著的提升,因此在目前社会中具有广泛的应用。
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