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采用支持介质的电泳应用广泛。采用支持介质的目的是防止电泳过程中的对流和扩散,使被分离组分得到最大分辨率的分离。
电泳用支持介质分为:
(1)无阻滞支持物 化学惰性,能将对流减到最小,其对蛋白质的分离是基于一定pH 条件下蛋白质的电荷密度。介质包括滤纸、醋酸纤维薄膜、纤维素、硅胶等。近年来其使用渐少。
(2)高密度凝胶 不仅能防止对流,降低样品扩散,还可以起到分子筛的作用,其对蛋白质的分离不仅取决于大分子的电荷密度,还取决于分子尺寸和形状。介质包括淀粉凝胶(由于质量不稳定且分离效果不好,已很少使用)、聚丙烯酰胺凝胶(孔径大小与蛋白质分子同数量级,因此具有分子筛作用)和琼脂糖凝胶(孔径较大,对大多数蛋白质仅有很小的分子筛作用)。
 
聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamidegel)是由单体丙烯酰胺(acrylamide,Acr)和交联剂N,N′亚甲基双丙烯酰胺(N,N′methylenebisacrylamide,Bis)在增速剂和催化剂的作用下聚合而成的三维网状结构的凝胶。聚丙烯酰胺凝胶是目前最常用的电泳支持介质,它不仅可用于常规PAGE,也可用作SDS-PAGE的凝胶介质,或用作等电聚焦等的介质。
聚丙烯酰胺凝胶的优点 
(1)在一定浓度时,凝胶透明,有弹性,机械性能好;
(2)化学性能稳定,与被分离物不起化学反应;
(3)对pH 和温度变化较稳定;
(4)几乎无电渗作用,样品分离重复性好;
(5)样品不易扩散,且用量少,其灵敏度可达10-6g;
(6)凝胶孔径可调节;分辨率高。
 
琼脂糖凝胶:天然琼脂由琼脂糖和琼脂胶组成,琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷;而琼脂胶是一种含羧基和硫酸根的酸性多糖。琼脂糖也是电泳最常用的一种支持介质。一般常用1%琼脂糖作为电泳支持物。琼脂糖凝胶应用于DNA分离、免疫电泳、蛋白质分离、蛋白质印迹、交变脉冲凝胶电泳及等电聚焦。
琼脂糖凝胶作为重要的电泳介质的特点:
(1)易于制备凝胶;
(2)其孔径较大,因此可用于免疫固定、免疫电泳和微量制备以及分离分子量比较大的物质;
(3)其机械强度较高;琼脂糖无毒;
(4)易于染色、脱色及储存电泳结果;
(5)琼脂糖的胶凝温度一般在34~43℃,融化温度在75~90℃。但是琼脂糖凝胶具有不同程度的电内渗,凝胶容易脱水收缩。

醋酸纤维薄膜
醋酸纤维是纤维素的醋酸酯,用醋酸纤维薄膜作支持介质的电泳操作简单、快速、价廉,目前多用于临床检验和医学上的常规分析。

新介质
聚丙烯酰胺和琼脂糖是目前最常用的两种电泳介质。聚丙烯酰胺凝胶的分辨率高,但孔径相对较小;而琼脂糖凝胶孔径大,因此琼脂糖聚丙烯酰胺混合凝胶(如琼脂糖的烯丙基缩水甘油衍生物)可有效地分离大分子。另外,电泳海绵也是很有前途的新型电泳介质。
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