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       蛋白质印迹就是把从电泳或色谱分离得到的蛋白质转移到固定基质上,以便用专一性免疫技术探测固定膜上的蛋白质。蛋白质印迹法(Western blotting )实际上是DNA 印迹法(Southern blotting)和RNA印迹法(Northern blotting)的发展。
蛋白质印迹的过程
       蛋白质印迹一般分为两个步骤:转移和检测。转移就是将蛋白质从凝胶转移到印迹膜上;检测又分为三步:先用封阻试剂封阻固定膜上未吸附蛋白质的区域;再用探针检出固定膜上感兴趣的蛋白质;最后用探针上的标记物显示感兴趣的蛋白质分子。
蛋白质印迹的主要类型
       根据转移方法的不同,蛋白质印迹主要分为扩散印迹、毛细管印迹和电泳印迹
       扩散印迹时,凝胶放在两张固定膜之间,浸在缓冲液中自由扩散2~3天后,就得到两张互为镜像对称的转移膜,每张膜得到一半蛋白质)。这种方法适合于大孔凝胶,虽然简便但费时,而且分辨率降低。
      毛细管印迹来源于DNA印迹法,在凝胶上放一张固定膜及一叠干滤纸,其上压以1~2kg重物,借助毛细管作用,当缓冲液流从储液腔流经凝胶和固定膜到滤纸上时,凝胶中的蛋白带随缓冲液流而转移到固定膜上。毛细管印迹适合于低分子量蛋白质和大孔凝胶。
      电泳印迹是用电场将凝胶中的蛋白带转移到印迹膜上,它需要特定的装置,转移效率高,转移条件易控制,且能保持原有的分辨率。这是目前
最广泛使用的印迹方法。
应用
       蛋白质印迹主要用于对极微量蛋白质进行分析、纯化、鉴定、复性等,如氨基酸的组成分析、序列分析、特异性结合分析等。

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